STREPTOKOK identifikasyonu :
- Hemoliz :
- Beta: tam hemoliz,Alfa : inkomplet hemoliz,
- Gama: non hemoliz
- Beta hemolitik streptokokların ayrımı: streptokokus pyogenes ( Agurubu Beta hemolitik streptokok) ve streptokokus agalaktia ( B gurubu streptokoktur) ayrımı bacitracin ve STX direncine bakılarak yapılır:
BACİTRACİN | STX | |
S. Pyogenes | DUYARLI | DİRENÇLİ |
S. Agalactia | DİRENÇLİ | DİRENÇLİ |
- SAFRALI ESKULİNE EKİM : Grup D streptokokları diğerlerinden ayırır. Grup D streptokoklar %40 safrada ürer, eskulini hidrolize eder ( siyahlaşır) diğer streptokoklar etmez.
- SAFRADA ERİME: S. Pneumonia ile diğer alfa hemolitik streptokokları birbirinden ayırmada kullanılır. Safra S. Pneumonia yüzeyini bozarak erimesine yol açar, koloni üstüne damlatılarak kısa sürede erime olup olmadığına bakılır.
- Alfa hemoliz yapan bakterinin Todd Hewitt buyyondaki kültüründen 3 tüp hazırlanır.
Tüp | Bakteri süspansiyonu | safra | Serum fizyolojik | bulanıklık |
I | var | Var | Yok | |
II | var | Yok | Var | |
III | yok | var | var |
2 saate kadar yarım saatte bir kontrol edilerek bulanıklığa bakılır 3. Tüp duru, 2. Tüp bulanık olmalıdır. 1 tüp duru ise erimiş yani PNEMOKOK denir, bulanık ise pnemokok değildir.
- Safrada erime testi safra tuzları ile de yapılabilir (Na deoksi kolat, Taurokolat) yine Todd Hewitt BY kullanılır, bakteri süspansiyonu üzerine fenol kırmızısı konur, üzerine NaOH ile pH 7 ye ayarlanır, üzerine safra tuzu konur, tüp berraklaşırsa erime vardır PNEMOKOK turdenir.
- Koloni erime deneyi : en çok yapılan safra erime testidir. BY de pnemokok düşünüle nkoloninin üzerine direk olarak safra tuzu eriyiği damlatılır 30 sn de koloni erirse pnemokoktur.
- OPTOKİN DUYARLILIĞI: pnemokokları diğer alfa hemolitiklerden ayırmak ta kullanılır. BY e optokin konur çap >16 mm ise duyarlı yani pnemokok, çap <16 ise diğer alfa hemolitik streptokoklar.
- %6.5 NaCl de üreme: ( 1000 grm buyyon+ 60 grm tuz + 15 grm agar)
- B gurubu streptokoklar ürer ( S. AGALACTİA)
- D gurubu streptokoklar
- ENTEROKOKLAR ÜRER ( PEN DİRENÇLİ)
- NON ENTEROKOKLAR ÜREMEZ ( PEN SENSİTİF)
- HİPPURAT HİDROLİZİ: B grubu beta hemolitikler ( agalactia ) hippurat + dir. Diğer beta hemolitikler – dir. S.agalactia içinde hippuraz var hippurik asidi benzoik asit+ glisine çevirir, ninhidrin damlatılırsa mor renk oluşur.
- CAMP ( CRİSTİ-ATKİNS-MUNCH-PETER) testi: B grubu streptokoklar CAMP oluşturur bu S. Aureus ların beta hemolizini arttırır. B gurubu streptokokalrın % 95 i CAMP pozitif dir. CAMP diskleri de var.
- PYR ( L- PYROLİDON BETA NAFTİLAMİN) HİDROLİZİ TESTİ: A gurubu ve D grubu streptokoklar PYR + dir. PYR testi bacitracinden daha sensitifdir. PYR besiyerleri ve diskler var. PYR + bakteriler ürerken naftilamin açığa çıkar üzerine PYR ayracı dökülürse kırmızı renk olur.
Beta hemolitik streptokokların serolojik identifikasyonunda koagulaz ve latex agglutinasyon testleri kullanılabilir, kapsül şişme testi ile pnemokoklar identifiye edilebilir.
- BETA HEMOLİZ
- BACİTRACİN duyarlılığı
- Duyarlı –àGABHS S. Pyogenes
- Dirençli
- CAMP HİPPURAT
- + ise Grup B Beta hemolitik strep -àStrep agalactia
- – ise
- %40 SAFRADA ÜREME VE ESCULİN HİDROLİZİ
- + GRUP D STREP
- %6.5 ÜREME + ENTEROKOK ESCULİN + PEN DİRENÇLİ
- %6.5 ÜREME – NON ENTEROKOK ESCULİN – PEN SENS
- – GRUP A- B DIŞI STREP
- + GRUP D STREP
- %40 SAFRADA ÜREME VE ESCULİN HİDROLİZİ
- CAMP HİPPURAT
- BACİTRACİN duyarlılığı
- ALFA HEMOLİZ
- OPTOKİN
- SESİTİF S. PNEMONİADİRENÇLİ VİRİDANS
- %40SAFRA ESCULİN
- – VİRİDANS
- + GRUP D STREP
- OPTOKİN
- NON HEMOLİTİK STREP GRUP D STREP
- %6.5 direnci
- NaCl + Penisilin Dirençli ise ENTEROKOK
- NaCl – Penisilin Sensitif ise NON ENTEROKOK
- %6.5 direnci
123 Total 3 Gün