BRUCELLA
GRAM negatif çomak, Hareketsiz, mikrokapsüllü, Glik+ H2S+
Brucella, hayvanlardan insanlara geçebilen, Gram-negatif, küçük, çubuk şeklinde bir bakteri cinsidir. Genellikle sığır, koyun, keçi, domuz ve köpek gibi hayvanlarda bulunur ve brucelloz adı verilen bir hastalığa neden olur. Brucella, insana genellikle kontamine gıda (özellikle çiğ süt ve süt ürünleri), solunum yoluyla veya doğrudan hayvanlarla temas yoluyla bulaşır. Önemli Brucella türleri şunlardır:
- Brucella canis: Köpeklerde bulunur.
- Brucella abortus: Sığır brucellozu ile ilişkili.
- Brucella melitensis: Koyun ve keçilerde bulunur, insanlarda en virulent olan türdür.
- Brucella suis: Domuzlarda görülen brucelloz.
Ülkemizde insanlarda bruselloz yapanlar :
- B. melitensis (3)
- B. abortus (9)
- B. suis (4)
Brusella lar en küçük gram negatif bakterilerdendir kokobasildir, hareketsizdir, organizmadan yeni ayrılanlar mikrokapsüllüdür. SERUM+ GLİSİN+GLİKOZ lu BY de iyi ürer. Şebnem tanesi gibi saydam durdukça esmerleşen R koloniler yapar. Glikoz + Gaz+ dir. Aerob ve mikroaerofildir. Brucellaların ayrımında H2S yapımları kullanılır.
- B. Suis 3 suşu vardır ve ençok ve en uzun süre H2S yapar,
- B. Abortus 9 suşu vardır ve daha az H2S yapar,
- B. Melitensis 4 suşu vardır ve en az H2S yapar.
Burcella lar Boyalardan etkilenmeleri, antijen yapıları ve Tibilisi fajına karşı duyarlılıkları ile suşlara ayrılırlar. Melitensis ve abortusa karşı monospesifik antikorlar vardır.
Brucella lar :
- Hepatit,
- Menenjit,
- Ensefalit,
- Orşit,
- Artrit,
- Endokardir,
- Osteomyelit,
- Pnemoni, plörezi,
- Bronşit yapabilir.
Tanı Yöntemleri
Brucella tanısı için çeşitli yöntemler kullanılmaktadır:
- Kültür: Özel besiyerlerinde bakterinin izole edilmesi.
- Serolojik Testler: Antikorların tespiti için serolojik testler (örneğin, Rose Bengal testi, ELISA).
- Moleküler Yöntemler: PCR gibi yöntemler, bakterinin genetik materyalini tespit etmek için kullanılır.
Brucella izolasyonunda castenada bifazik besiyeri hemokültür için kullanılır.
BRUCELLA besiyerleri:
- Antibiyotikli, glikozlu, serumlu buyyon,
- Brucella buyyon veya agar,
- Çukulata agar,
- Kanlı jeloz kulanılır.
- Kan bos gibi örnekler bol ( 50 – 100 ) ml sıvı BY ekilir.
- Tüm ekimler çift yapılır
- %5-10 co2 Lİ 37 Cve
- NORMAL
- İçinde başka bakterilerinde olduğu düşünülüyor ise katı selektif BY kullanılır. ,
- Brucella lar ilk izolasyonda yavaş ürerler,- negatif demek için 30 gün beklemek gerekir.
- Kronik ve aktivasyonlar ile seyreden brucellarda izolasypon şansı yüksektir.
- Besiyerlerir 4. Günden başlayarak her 2-3 günde bir incelenerek pasajlanır.
- Buradan brucella agar BY e damlatılarak ekilir.
- CASTENADA BY brucella bifazik BY dir hemokültür için kullanılır Brucella agar + buyyon kullanılarak yapılır.
- BOS da castenada ya ekilir.
BRUCELLA İDENTİFİKASYONU
- Brucella yatık BY ekilir içine kurşun asetatlı kağıt şerit sarkıtılır. Kurşun asetatlı kağıt şerit H2S varlığını gösterir, siyahlaşırsa + dir ve değiştirilir, kaç gün sürdüğüne bakılır. H2S ne zaman başladı ve kaç gün sürdüğüne göre brucellalar ayrılır.
- Kaç gün H2S yaptı
- B. Suis >3 gün
- B. Abortus 2 gün
- B. Melitensis <1 gün
- Boyalarda üremeye göre ayrım
- Thionin ve fucsin varlığında üreyebiliyormu ?
- 100 er ml lik 3 brucella agarların üzerine thionon i n saf sudaki%0.1 lik eriyiğinden 1 – 2 ve 4 ml eklenir böylece a- 1/ 100000 b- 1/50000 ve c- 1/25000 lik thioninli brucella ağarlar elde edilir.
- 100 er ml lik 2 brucella agar üstüne fuscin in %0,1 lik eriyiğinden 1 ve 2 ml ilave edilir. Böylece a- 1/100000 ve b 1/ 50 000 lik fuscinli ağarlar elde edilir. Brucella kolonisinden plak üstüne çizgi şeklinde çift ekim yapılır, biri CO2 li biri normal etüvde 48 saat sonra ürmeye bakılır:
THİONİN VARLIĞINDA ÜREME | FUSCİN VARLIĞINDA ÜREME | ||||
a | b | c | a | b | |
Melitensis | – | + | + | + | + |
Abortus | – | + | + | + | + |
Suis | + | + | + | + | + |
- Brucella identifikasyonunda ÜREAZ testi: Christiansen üreaz ağara saf kültür ekimi yapılır.
- SUİS : 20 dakikada +
- MELİTENSİS: 2 saat sonra +
- BOVİS: – veya saatler sonra + reaksiyon verir.
- Brucella lam ve tüp agglütinasyon ile identifikasyon:
- PAUL BUNNEL: Brucella lan ağglütnasyon testidir. Lam agg ile Melitensis i abortus ve suis ten ayırmak mümkün değildir.
- WRİGHT : brucella tüp agglütinasyon testidir. Tüp agg ile abortus suis ve melitensis birbirinden ayrılır.
- Brucella hayvan deneyleri: şüpheli hasta kanından 58 – 10 ml kobay peritonuna inoküle edilir, brucella varsa hayvanda 2 – 4 hafta sonra ateş ve Sepsis gelişir. Hayvan hamile ise düşük yapar. Otopsi yapılır kan, LG dalak tan kültü yapılır.