GRAM BOYAMA NASIL YAPILIR

image_pdfimage_print

GRAM BOYAMA: 

Gram + bakteriler ile Gram – bakteriler arasındaki yapısal fark boyanmalarını etkiler.

Gram pozitif bakterilerde bulunan kalın peptidoglikan tabakası kristal moru boyasını tutar su ile yıkanmada ve de alkolle dekolorizasyonda boyayı bırakmaz. Gram negatif bakterilerde peptidoglikan tabaka incedir ayrıca lipopolisakkarit katmanı vardır bu kristal moru ile boyanmaz. dekolorizasyonda boya tutmaz, zıt boya olan sulu fuksin ile boyanıp kırmızı görülür.

  • Örnekten ince bir yayma hazırlanarak lam havada kurutulur.
  • Kuruyan lam alevden geçirilerek tespit edilir.
  • Kristal viyole dökülerek iki dakika bekletilir.
  • Kristal viyole boyası dökülür kalan boya üzerine Lugol solüsyonu dökülür.
  • Lugol solüsyonunda iki dakika bekletilir.
  • Alkol ve su ile renk giderilinceye dek yıkanır.
  • Sulu fuksin dökülerek bir dakika bekletilir.
  • Çeşme suyu ile yavaşca yıkanır ve kurutulur.
  • İmmersiyon objektifi ile incelenir (100x objektif)
  • Mor renkli bakteriler Gram +, Kırmızı renkli bakteriler Gram – olarak adlandırılır.

Alkol ile yapılan renksizleştirme işleminde gram pozitif bakteriler boyayı bırakmazlar, gram negatif bakteriler boyayı bırakırlar ve reksizleşirler, bunlar sulu fuksin ile zıt boyanırlar ve kırmızı görülürler. Eski kültürlerde gram pozitif bakteriler boyayı bırakabilirler yada bazı bakteriler gram boyayı iyi tutamazlar bunlara gram labil bakteriler denir, bazen mor bazen kırmızı boyanırlar  (ör: Laktobasiller ).

İŞLEM
YÖNTEM
SONUÇ
GRAM POZİTİF BAKTERİ
GRAM NEGATİF BAKTERİ
KRİSTAL VİOLE 1 – 2 DAKİKA MOR MOR
LUGOL ( MORDAN ) 1 DAKİKA MOR MOR
DEKOLORİZASYON ALKOL 20 – 30 SN MOR RENKSİZ
SULU FUKSİN  (ZIT BOYA) 1 DAKİKA MOR KIRMIZI

 

Kristal Viyole boyası nasıl hazırlanır? 

Kristal Violet …………………………1gr

Fenol kristali ( Asit Fenik)……….2gr

Etanol (%96) etil alkol…………….10ml.

Distile su………………………………..100ml.

Kristal viyole ve fenol kristalini havanda ez, toz haline gelince yavaşça etanol ekle, etanol bitince distile su ile yavaşça karıştır, filtre kağıdından süz, oda ısısında sakla.

Lugol (Mordan) solüsyonu nasıl hazırlanır?

İyot kristal ………………………………1gr

Potasyum İodür (KI) kristal ……..2 gr

distile su …………………………………300 ml

Potasyum iodür ile iyot kristali havanda iyice ezilip toz haline getirilir, yavaşca distile su ilave edilir, filtre kağıdından süzülerek kahverengi şişeye konur, oda ısıında saklanır.

Bazik Fuksin ( stok solüsyon ) nasıl hazırlanır ? 

Bazik fuksin ……………………………10 fr

Etanol %96 (etil alkol)……………..100 ml

bazik fuksin havanda ezilir, toz haline gelince yavaşca alkol ile karıştırılır.37 C de bir gece etüvde bekletilir, filtre kağıdından süzülerek cam kapaklı şişede oda ısısında saklanır.

Sulu Fuksin solüsyonu nasıl hazırlanır?

Bazik Fuksin stok solüsyonu ……..10 ml

Distile su…………………………………..100 ml

Bazik Fuksin distile suyla iyice karıştırılarak filte kağıdından süzülür, cam kapaklı şişede oda ısısında saklanır.

 

2232 Total 2 Gün

Bu yazıyı beğendiniz mi?

/ 5.

As you found this post useful...

Follow us on social media!

We are sorry that this post was not useful for you!

Let us improve this post!

Posted in MEDİKAL
Tags: , , , , , , , , ,